Simultaneous assessment of plasmatic, acrosomal, and mitochondrial membranes in ram sperm by fluorescent probes / Avaliação simultânea das membranas plasmática, acrossomal e mitocondrial de espermatozoides de carneiros por sondas fluorescentes

In this experiment, it was defined a protocol of fluorescent probes combination: propidium iodide (PI), fluorescein isothiocyanate-conjugated Pisum sativum agglutinin (FITC-PSA), and JC-1. For this purpose, four ejaculates from three different rams (n=12), all showing motility >80 percent and abnormal morphology <10 percent, were diluted in TALP medium and split into two aliquots. One of the aliquots was flash frozen and thawed in three continuous cycles, to induce damage in cellular membranes and to disturb mitochondrial function. Three treatments were prepared with the following fixed ratios of fresh semen:flash frozen semen: 0:100 (T0), 50:50 (T50), and 100:0 (T100). Samples were stained in the proposal protocol and evaluated by epifluorescence microscopy. For plasmatic membrane integrity, detected by PI probe, it was obtained the equation: v=1.09+0.86X (R²=0.98). The intact acrosome, verified by the FITC-PSA probe, produced the equation: v=2.76+0.92X (R²=0.98). The high mitochondrial membrane potential, marked in red-orange by JC-1, was estimated by the equation: v=1.90+0.90X (R²=0.98). The resulting linear equations demonstrate that this technique is efficient and practical for the simultaneous evaluations of the plasmatic, acrosomal, and mitochondrial membranes in ram spermatozoa.

Neste experimento, foi definida uma combinação de sondas fluorescentes: iodeto de propídio (PI), aglutinina de Pisum sativum conjugada ao isotiocionato de fluoresceína (FITC-PSA) e JC-1. Para esta proposta, quatro ejaculados de três carneiros (n=12), que apresentavam motilidade >80 por cento e alterações morfológicas <10 por cento, foram diluídos em meio TALP e divididos em duas alíquotas. Uma alíquota foi submetida a três ciclos de flash frozen e descongelação, para induzir danos nas membranas celulares e distúrbios na função mitocondrial. Três tratamentos foram preparados com as seguintes proporções preestabelecidas de sêmen fresco: sêmen submetido a flash frozen: 0:100 (T0), 50:50 (T50) e 100:0 (T100). As amostras foram coradas no protocolo proposto e avaliadas por microscopia de epifluorescência. Para integridade de membrana plasmática, detectada pela sonda PI, foi obtida a equação: v=1,09+0,86X (R²=0,98). O acrossomo intacto, verificado pela sonda FITC-PSA, produziu a equação: v=2,76+0,92X (R²=0,98). O alto potencial de membrana mitocondrial, marcada em vermelho-alaranjado pelo JC-1, foi estimado pela equação: v=1,90+0,90X (R²=0,98). As equações lineares resultantes demonstraram que a técnica é eficiente e prática para avaliação simultânea das membranas plasmática, acrossomal e mitocondrial em espermatozoides de carneiros.

Diagnóstico de cistos ovarianos pela palpaçäo de ultra-sonografia transretal em fêmeas suínas: relato de dois casos clínicos / Ovarian cysts, rectal palpation and ultra-rectal ultra-sonography diagnosis in sows: literature review and two clinical report studies

Foram abordados alguns conceitos sobre a fisiopatologia e a semiologia de cistos ovarianos em fêmeas suínas, descrevendo-se dois casos clínicos, um sintomático. Observou-se infertilidade, cios irregulares, edema de vulva e clitóris aumentado de volume. A palpaçäo retal, constataram-se cistos em ambos os ovários da fêmea com sintomas e um cisto no ovário esquerdo da assintomática. A ultra-sonografia possibilitou visualizar, assim como avaliar com precisäo grau de luteinizaçäo e o tamanho dos cistos. A necrópsia confirmou os achados da palpaçäo e ultra-sonografia transretal

Biochemical study of semen of buffaloes. I. Determinantions of fructose, calcium, GOT and GPT

Seis búfalos provenientes de cruzamentos entre as raças Jaffarabadi e Mediterrâneo, com aproximadamente 36 meses de idade, foram submetidos a 16 colheitas de sêmen, quinzenalmente, entre os meses de maio a agosto de 1990, por meio de eletroejaculaçäo ou vagina artificial. No sêmen total foram determinadas, em mg/ml, as concentraçöes de frutose e cálcio, enquanto que, na fraçäo rica em espermatozóides, fizeram-se dosagens de GOT e GPT, em ug/ml. Verificou-se que nas amostras colhidas com vagina artificial os valores de frutose foram significantemente maiores, ao passo que, naquelas obtidos por eletroejaculaçäo, predominaram valores mais altos de GOT e GPT. Relativamente ao cálcio, näo houve diferença significativa quanto aos métodos de colheita